最后,臨床取樣過(guò)程也非常重要。例如,新冠疫苗導(dǎo)致的假陽(yáng)性在疫苗中的核酸片段被完全降解之前,如果留在人體表面或衣服上的核酸片段污染了樣本,則在高靈敏度PCR擴(kuò)增后很可能產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。
不得在安全柜內(nèi)添加陽(yáng)性對(duì)照品和弱陽(yáng)性質(zhì)控品;操作時(shí)手套的尺寸必須合適。寬松的手套更容易被污染。如果手套可能受到污染,應(yīng)及時(shí)將手套退回并丟棄,并更換新手套。經(jīng)常更換手套可以有效地減少各種污染。
目前,大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室都有大量的檢測(cè)工作,在樣品添加和提取過(guò)程中容易發(fā)生交叉污染。特別是,當(dāng)重點(diǎn)人群(如隔離人員)的樣本與普通健康篩查人群的樣本一起檢測(cè)時(shí),更容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。在這方面,我們應(yīng)該注重人群樣本和一般健康篩查人群樣本的儲(chǔ)存和批量檢測(cè)。
在檢測(cè)過(guò)程中,我們應(yīng)該按照《醫(yī)療機(jī)構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測(cè)工作手冊(cè)(試行第二版)》要求中隨機(jī)放置3個(gè)生理鹽水,以便在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中監(jiān)測(cè)污染情況。
如果PCR管蓋蓋不嚴(yán)或加熱變形,擴(kuò)增產(chǎn)物會(huì)蒸發(fā)到PCR儀器和實(shí)驗(yàn)室中,造成大量持續(xù)污染。尤其是弱陽(yáng)性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控孔泄漏后,更容易污染實(shí)驗(yàn)室,產(chǎn)生大量假陽(yáng)性。在這方面,我們應(yīng)該選擇質(zhì)量檢驗(yàn)合格的匹配PCR管和管蓋。
取樣后,確認(rèn)所有PCR管均已覆蓋且無(wú)松動(dòng),然后使用機(jī)器進(jìn)行擴(kuò)增;擴(kuò)增PCR管應(yīng)小心取出,迅速放入密封袋中,用于一般醫(yī)療廢物處理。嚴(yán)禁打開(kāi)蓋子和高壓滅菌處理。對(duì)于容易出現(xiàn)假陽(yáng)性的實(shí)驗(yàn)室,應(yīng)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室環(huán)境污染評(píng)估實(shí)驗(yàn)。如果實(shí)驗(yàn)室環(huán)境受到污染,應(yīng)暫停日常實(shí)驗(yàn)室測(cè)試,并對(duì)環(huán)境進(jìn)行清潔、消毒和通風(fēng)。
如果試劑在制備過(guò)程中被陽(yáng)性質(zhì)控品或陽(yáng)性樣品污染,則整板測(cè)試為陽(yáng)性。通過(guò)更換試劑并重新放大,可以確定擴(kuò)增產(chǎn)物是否受到污染或試劑受到污染。作為預(yù)防措施,我們應(yīng)嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室的規(guī)章制度,如實(shí)驗(yàn)室的單流程操作和實(shí)驗(yàn)室工作服和物品的不混合;同時(shí),還應(yīng)注意陽(yáng)性質(zhì)控品和作者前面提到的陽(yáng)性質(zhì)控品的儲(chǔ)存。
當(dāng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,我們?nèi)匀徊荒芊潘删?,除了正確發(fā)布報(bào)告外,為保障下一次實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行,避免假陽(yáng)性,實(shí)驗(yàn)室清潔及2小時(shí)的紫外消殺、定期使用核酸清除劑處理工作臺(tái)面、加樣槍、實(shí)驗(yàn)室終末消毒等工作也必不可少。




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